Amerikaszerte rejtélyes halálesetek nyomozása közben az FBI elemzője, Grace Ashcraft az első számú gyanúsított kezébe kerül. A történet során Grace-nek súlyos kihívásokkal, ismeretlen fenyegetésekkel kell szembenéznie, miközben csak korlátozott mennyiségű gyógyítószer és lőszer áll rendelkezésére.
Miközben Grace a túlélés útját keresi, egy másik ügynök is részt vesz a nyomozásban: Leon S. Kennedy, a Raccoon City túlélője. Leon fizikai erejét és változatos harci technikáit vetheti be, közelharcban és távharcban egyaránt, sőt, akár az ellenfelek saját fegyverét is a visszájukra fordíthatja.
A játék lehetőséget kínál többféle kameranézetre, így az élmény mind harmadik, mind első személyű perspektívából élvezhető. Különböző nehézségi szintek is elérhetőek, köztük célzósegédet biztosító mód a kevésbé tapasztalt játékosok számára.
Ahogy Grace és Leon útjai keresztezik egymást, közös sorsuk központi témát ad a történetnek. Vajon mit fedeznek majd fel, amikor útjaik összefonódnak?
